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Serum Adiponectin Levels and Severity of Coronary Artery Disease by Gensini Score

Walaa Farid (MD)*, Rehab Ibraheem Yaseen (MD)*, Alshaimaa Ali (MBBCH) ** 

Authors� affiliations:                                                               
*Cardiology Department, Faculty of Medicine, Menoufia University, Egypt
**Resident of cardiology at Sohag Cardiac Center, Sohag, Egypt.
No funding.
No Conflict of interest
Corresponding author and reprint: 
Name: Rehab Ibrahim Yaseen
Address: Shebin Elkom, Egypt
Email: dr_r.yaseen @hotmail.com
Key words: Adiponectin, coronary artery disease, coronary angiography, modified Gensini score.
Introduction
 Coronary artery disease CAD is the leading cause of death worldwide, and it is expected that the rate of CAD will accelerate in the next decade. The global burden of CAD carries with it a heavy financial cost (1). Recently, adipose tissue has shed its label as a sedentary storage depot of excess energy, and has emerged as a metabolically active participant in mediating vascular complications, serving as an active endocrine and paracrine organ secreting an increasing number of mediators, known as adipokines, which participate in diverse metabolic processes. Although most adipokines such as leptin, TNF,  and a plasminogen activator inhibitor-1 appear to promote vascular disease, but among these adipokines is adiponectin which seems to possess anti-atherogenic and anti-inflammatory effects and may be protective against cardiovascular disease development(1). Adiponectin inhibits the transformation of human monocyte-derived macrophages into foam cells by inhibiting the class A macrophage scavenger receptor. Some findings suggest a role of adiponectin in atherosclerosis by inhibiting binding of LDL to biglycan which is a vascular proteoglycan. This ultimately decreases lipid accumluation in the subendothelial space, the cause of atherosclerotic plaque formation (2). The aim of the study was to evaluate the correlation between serum adiponectin levels and severity of CAD as assessed by coronary angiography using modified Gensini score (3).
Subjects and Methods 
It is a cross-sectional study. The study population included ninety subjects recruited from catheterization unit in Menoufia University Hospital and Sohag Cardiac Center who underwent elective coronary angiography in the period from January 2016 to December 2016, a detailed medical history was obtained from every subject and risk factors of CAD were established. Subjects were also evaluated by physical examination and 12-lead electrocardiography. Exclusion criteria were DM, infectious disease,  thyroid dysfunction, and liver dysfunction based on medical history or laboratory tests, neoplastic disease, chronic renal failure (Cr >2.0 mg/dl) or on hemodialysis. The ethical implications regarding the study were approved by the local ethics committee and informed consent was obtained from each patient.

Demographic, clinical data and routine biochemistry analyses in form of serum creatinine, lipid profile and serum adiponectin levels of all the subjects were performed. Serum samples for adiponectin were centrifuged and stored at -20 C in the laboratory and serum adiponectin levels were measured by ELISA method, using (Assay Max Human Adiponectin ELISA (Acrp30) kit, ASSAYPRO LLC Laboratory Medicine Inc., USA). Selective coronary angiography by standard seldinger technique was performed for all subjects. Evaluation of all coronary angiograms was made by two observers who were blinded to the clinical and laboratory data. The severity of coronary lesions was assessed using the modified Gensini score. Scoring was applied as follows: 5 scores for left main coronary lesion; 2.5 scores for proximal left anterior descending (LAD) artery and the left circumflex artery (LCX); 1.5 scores for the mid-LAD artery lesion; 1 score for the first diagonal branch (D1), the obtuse marginal branches and the right coronary artery; 0.5 score for the second diagonal (D2) and the LCX posterior-lateral branch (3).
Statistical analyses
Results were statistically analyzed by SPSS version 20 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Student's t-test was used to indicate the significance between 2 means. Chi-Squared (�2) test was used for comparison regarding qualitative variables. Pearson's correlation was used to show strength and direction of association between two quantitative variables. Receiver operating characteristic (ROC curve) is a graphical plot of the sensitivity, vs. false positive rate (one minus the specificity). P value: Significant difference if d"0.05.
Results 
Our study included ninety subjects divided into group A= 36 subjects with normal coronary arteries (21males and 15females) with mean age 55.55�11.62 and  group B= 54 patients with CAD (41male and 13females) with mean age 56.90�11,Table1.Group B then subdivided in to: group (1): 17 patients (13males and 4females) with single-vessel disease , group (2): 12 patients (7males and 5females) with two-vessels disease, group (3): 19 patients (16males and 3females) with multi-vessels disease, and group (4): 6 patients (5males and 1female) with left-main disease. There was no statistically significant difference as regard to age (P =0.528) and sex (P =0.077) in the studied groups. Smoking was significantly more prevalent in patients with CAD than those with normal coronary arteries group (P =0.037).  Serum adiponectin level in patients with CAD was found to be statistically highly significant lower than those with normal coronary arteries group (P <0.001), and there was no statistically significant difference in patients with single-vessel disease and normal coronary arteries group (P =0.092), while it was found to be significantly lower in the patients with two vessels, multi-vessels disease and LM disease compared to normal coronary arteries group (P <0.001). Table1.  EF was statistically significant higher in normal coronary arteries group and patients with multi-vessels disease compared to patients with single-vessel disease (P =0.044). On the contrary, there was no statistically significant difference among other groups and subgroups compared to each other (P =0.103). When analyzing subgroups of patients with CAD, we found that, serum adiponectin level was statistically significant lower in patients with two-vessel disease (G2), multi-vessels disease (G3) and, LM disease (G4) as compared to single-vessel disease (G1).Also, it was statistically significant lower in patients with  multi-vessels disease (G3) compared to patients with  two-vessels disease (G2) (P<0.05). While, there was no statistically significant difference in patients with LM disease (G4) compared to patients with  multi-vessels disease (G3) and two-vessels disease (G2) (P >0.05).As regard to modified Gensini score, it was highly statistically significant higher in patients with two-vessels disease 33.75 QUOTE  17.73, multi-vessels disease 67.28�41.61 and left-main disease 80.16� 47.25 compared to patients with single- vessel disease 8.02�6.0, and in patients with multi-vessels disease and left-main disease compared to patients with two-vessels disease, while there was no statistically significant difference in patients with left-main disease compared to patients with multi-vessels disease, and this may be due to small number of left-main disease group. Table 2. Receive-operating characteristic (ROC) curve showed that~ Cut off value of serum adiponectin level for predicting CAD was <6.95 ng/ml with sensitivity 85%, specificity 69%, accuracy 79%, PPV 81% and, NPV 76%, and cut off value of serum adiponectin level for prediction of severity of CAD in two-vessels disease was <6.6 ng/ml, for multi-vessels disease was <5.9 ng/ml and finally for left-main disease was <5.8ng/ml. Table 3, figure 1.There was a significant negative linear correlation between modified Gensini score and serum adiponectin levels in the studied patients group and subgroups. Table 4.  

Discussion:
Coronary artery disease (CAD) is a major cause of death and disability in developed countries. Although CAD mortality rates worldwide have declined over the past four decades, CAD remains responsible for about one-third or more of all deaths in individuals over age 35 (4-6). Although most adipokines such as leptin, TNF, and a plasminogen activator inhibitor-1 appear to promote vascular disease, but among these adipokines is adiponectin which seems to possess anti- atherogenic and anti-inflammatory effects and may be protective against cardiovascular disease development (1), therefore understanding the clinical significance of adiponectin may be helpful in preventing the development of atherosclerotic vascular diseases.(7) Our study showed that, serum adiponectin levels were significantly lower in patients with angiographically diagnosed CAD compared to the normal coronary group. This agreed with result reported by Mohamed et al. (8) who found serum adiponectin levels were significantly lower in patients group compared to the control group and revealed that this finding might be attributed to the loss of protective functions of adiponectin on the vascular endothelium that may allow vascular inflammatory events to occur more rapidly. Selcuk et al. (9) showed that patients with significant CAD had lower plasma adiponectin concentrations than those without CAD in a study performed for patients with metabolic syndrome undergoing coronary angiography. In addition, our study showed that, serum adiponectin levels were not significantly different in single-vessel lesions compared to the normal coronary  arteries group; whereas it was found to be significantly lower in patients with two-vessels, multi-vessels  and left-main lesions when evaluated by usual method of scoring systems for severity of CAD . These results were confirmed by Gokosoy et al. (10) who found that, serum adiponectin levels were not significantly different between patient's subgroup with single-vessel disease and control group, while it was found to be significantly lower in the patients subgroups with two-vessels and multi-vessels lesions compared to control group. As a result, it may be suggested that low serum adiponectin levels may indicate multi-vessels (e"2 vessels) or left-main disease rather than single-vessel disease. This disagreed with another study reported by Mohamed et al.(8) in which, there was a significant difference in serum adiponectin levels in patients with single-vessel lesion compared to the control group, this may be attributed to small numbers of patients of single-vessel disease in our study compared to their study. In another study done by Cavuflolu et al. (11)  in which coronary angiography was performed for male patients with stable angina pectoris, unstable angina pectoris and non-ST elevation myocardial infarction (MI), it was found that low serum adiponectin levels were a predictor of acute MI and cardiac mortality. It has been suggested that CAD patients with complex lesions have lower serum adiponectin levels and that decreased adiponectin levels may indicate sensitivity of plaque (12). When we analyzed CAD patients subgroups, we found that, there was a significant negative correlation between serum adiponectin levels and modified Gensini scores, meaning that, there was decreased serum adiponectin levels with CAD progression, and it was highly statistically significant higher in patients with two-vessels disease, multi-vessels disease and left-main disease compared to single-vessel disease, and in multi-vessels disease and left-main disease compared to two-vessels disease. Similar results were reported by Shams et al. (13) who found a significant linear negative correlation between serum adiponectin levels and severity of CAD based on usual method for reporting coronary angiogram. In our study, the mean Gensini score in the patients group was found to be 40.52 �41.02 and  when we demonstrated the cut-off point of serum adiponectin level for detecting CAD, it was <6.95 ng/ml with sensitivity 85%, specificity 69% and Accuracy 79%, As regard cut-off values of serum adiponectin level for prediction of severity of CAD in two-vessels disease, it was <6.6 ng/ml, for multi- vessels disease, it was < 5.9 ng/ml and finally for left-main disease, it was < 5.8 ng/ml. In contrary to our study, Gokosy et al.,(10) found that, serum adiponectin level was 2.0�2.0 �g/dL and the mean Gensini score in the patients group was found to be 3.8�1.7, Shams et al. (13)enrolled the mean serum adiponectin level was 11.4�6.29 ng/ml and mean Gensini score was 33.2�38.29. The strength of our study was that, it approved the presence of a significant negative linear correlation between serum adiponectin levels and modified Gensini score as a predictor of severity of CAD not only in total patients but also in each subgroup of CAD patients categorized by usual method of scoring system for reporting coronary angiogram individually.



Limitations
Only total form of adiponectin was measured while High Molecular Weigh (HMW) adiponectin alone may be a clinically useful marker of CAD than total form. 
Conclusion 
Serum adiponectin levels are decreased in CAD patients compared to normal coronary arteries group. This decrease is more prominent with increasing levels of CAD severity. Measurement of serum adiponectin may be used as a novel diagnostic tool for risk stratification of patients with CAD.
References
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Shams M, Rasekhi Kazerouni A, Ostovan MA, Omrani GR. The Relationship between Serum Adiponectin Levels with the Presence and Severity of Coronary Artery Disease. Arch Iran Med. 2012; 15(10): 611   16.





Legend of figures.
Figure (1): ROC curves of the studied groups showing sensitivity, specificity and accuracy of serum adiponectin levels for predicting of CAD and detection of its severity.

Table (1): Comparison between the studied groups as regard to adiponectin, age, sex, and risk factors of CAD.

CharacteristicsGroupsTest of significanceP valueNormal coronary arteries
Group A
(N=36)CAD patients
       Group B
(N=54)Mean �SDMean �SDAdiponectin7.53 �1.555.46 �1.63t=6.02<0.001*Age (Y)  55.55 �11.6256.90 �11.23t=0.550.582Sex 
Male
FemaleN0
21
15%
58.3
41.7No
41
13%
75.9
24.1�2
3.11
0.077Smoking 1644.43666.7�20.037*Hypertension 
15
41.7
27
50.0�2
0.60
0.438Family history
5
13.9
9
16.7�2
0.12
0.722Dyslipidemia
10
27.8
17
31.5�2
0.14
0.707*: significant.


Table (2): Comparison of serum adiponectin levels, modified Gensini score, and EF in the studied groups and subgroups


Normal coronary GA 
(N=36) CAD patients  GB (N=54)

Test
P value


P valueG1
(n=17)G2
(n=12)G3 
(n=19)G4
(n=6)Mean
�SDMean �SDMean 
�SDMean
 �SDMean
 �SDSerum
adiponectin
Levels 
ng/ml7.53 �1.556.83 � 1.645.61� 1.304.53 � 0.844.25 � 1.28F=
19.06
P <0.001*A vs. 1=0.092
Avs. 2<0.001*
Avs. 3<0.001*
Avs. 4<0.001*
1 vs. 2=0.024*
1 vs. 3=0.001*
1 vs. 4<0.001*
2 vs. 3=0.039*
2 vs. 4=0.055
3 vs. 4=0.670Modified Gensini score-8.02 � 6.033.75� 17.7367.28 � 41.6180.16 � 47.25Kruskal-Wallis
=35.12
P<0.001*1 vs. 2<0.001*
1 vs. 3<0.001*
1 vs. 4<0.001*
2vs. 3=0.011*
2 vs. 4=0.013*
3 vs. 4=0.445EF60.41 �7.6254.52 � 10.0157.50� 8.5159.89 � 5.5959.33 � 6.74F=1.82
P=0.132Avs. 1=0.013*
A vs. 2=0.268
A vs. 3=0.815
A vs. 4=0.755
1 vs. 2=0.318
1 vs. 3=0.044*
1 vs. 4=0.201
2 vs. 3=0.410
2 vs. 4=0.641
3 vs. 4=0.879* Significant., G: group, G1=single-vessel patients, G2=Two-vessel patients, G3=Multi-vessels patients, G4=LM patients, EF=ejection fraction







Table (3): Sensitivity, specificity and accuracy of serum adiponectin levels in the studied patients and subgroups for detection of CAD and prediction of its severity. 
              Serum  adiponectin levelTotal patients   GBG1G2G3G4AUC0.810.630.840.970.97Sig <0.001*0.120<0.001*<0.001*<0.001*Cutoff point <6.95-d"6.60d"5.90d"5.80Sensitivity 85%-92.0%100%100%Specificity 69%-64.0%84%834%PPV81.0%-46.0%76%60%NPV76%-96.0%100%100%Accuracy 79%-71.0%89%90%     * Significant., G: group, G1=single-vessel patients,G2=Two-vessel patients,G3=Multi- vessels patients,G4=LM patients

Table (4): Correlation between serum adiponectin levels and modified Gensini score in the studied patients group and subgroups.
	       Serum  adiponectin level	CAD patients GB (N=54)CAD
Patients
GBG1
(n=17)G2
(n=12)G3
(n=19)G4
(n=6)RP valuerP valuerP valuerP valuerP valueMidified
Gensini score-0.7060.002*-0.8460.001*-0.813<0.001*-0.8860.019*-0.903  <0.001** Significant., G: group, G1=single-vessel patients, G2=Two-vessel patients,G3=Multi-vessels patients,G4=LM patients











         








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