����JFIFXX�����    $.' ",#(7),01444'9=82<.342  2!!22222222222222222222222222222222222222222222222222����"��4�� ���,�PG"Z_�4�˷����kjز�Z�,F+��_z�,�© �����zh6�٨�ic�fu���#ډb���_�N�?��wQ���5-�~�I���8����TK<5o�Iv-�����k�_U_�����~b�M��d����Ӝ�U�Hh��?]��E�w��Q���k�{��_}qFW7HTՑ��Y��F�?_�'ϔ��_�Ջt��=||I ��6�έ"�����D���/[�k�9���Y�8ds|\���Ҿp6�Ҵ���]��.����6�z<�v��@]�i%��$j��~�g��J>��no����pM[me�i$[����s�o�ᘨ�˸ nɜG-�ĨU�ycP�3.DB�li�;��hj���x7Z^�N�h������N3u{�:j�x�힞��#M&��jL P@_���� P��&��o8������9�����@Sz6�t7#O�ߋ �s}Yf�T���lmr����Z)'N��k�۞p����w\�Tȯ?�8`�O��i{wﭹW�[�r�� ��Q4F�׊���3m&L�=��h3����z~��#�\�l :�F,j@�� ʱ�wQT����8�"kJO���6�֚l����}���R�>ډK���]��y����&����p�}b��;N�1�m�r$�|��7�>e�@B�TM*-iH��g�D�)� E�m�|�ؘbҗ�a��Ҿ����t4���o���G��*oCN�rP���Q��@z,|?W[0�����:�n,jWiE��W��$~/�hp\��?��{(�0���+�Y8rΟ�+����>S-S����VN;�}�s?.����� w�9��˟<���Mq4�Wv'��{)0�1mB��V����W[�����8�/<� �%���wT^�5���b��)iM� pg�N�&ݝ��VO~�q���u���9� ����!��J27����$O-���! �:�%H��� ـ����y�ΠM=t{!S�� oK8������t<����è:a������[�����ա�H���~��w��Qz`�po�^ ����Q��n� �,uu�C�$ ^���,������8�#��:�6��e�|~���!�3�3.�\0��q��o�4`.|� ����y�Q�`~;�d�ׯ,��O�Zw�������`73�v�܋�<���Ȏ�� ـ4k��5�K�a�u�=9Yd��$>x�A�&�� j0� ���vF��� Y�|�y��� ~�6�@c��1vOp�Ig����4��l�OD���L����� R���c���j�_�uX6��3?nk��Wy�f;^*B� ��@�~a�`��Eu������+���6�L��.ü>��}y���}_�O�6�͐�:�YrG�X��kG�����l^w���~㒶sy��Iu�!� W ��X��N�7BV��O��!X�2����wvG�R�f�T#�����t�/?���%8�^�W�aT��G�cL�M���I��(J����1~�8�?aT ���]����AS�E��(��*E}� 2��#I/�׍qz��^t�̔���b�Yz4x���t�){ OH��+(E��A&�N�������XT��o��"�XC��'���)}�J�z�p� ��~5�}�^����+�6����w��c��Q�|Lp�d�H��}�(�.|����k��c4^�"�����Z?ȕ ��a<�L�!039C� �Eu�C�F�Ew�ç ;�n?�*o���B�8�bʝ���'#Rqf���M}7����]����s2tcS{�\icTx;�\��7K���P���ʇ Z O-��~��c>"��?�������P��E��O�8��@�8��G��Q�g�a�Վ���󁶠�䧘��_%#r�>�1�z�a��eb��qcPѵ��n���#L��� =��׀t� L�7�`��V���A{�C:�g���e@�w1 Xp3�c3�ġ����p��M"'-�@n4���fG��B3�DJ�8[Jo�ߐ���gK)ƛ��$���� ���8�3�����+���� �����6�ʻ���� ���S�kI�*KZlT _`���?��K����QK�d����B`�s}�>���`��*�>��,*@J�d�oF*����弝��O}�k��s��]��y�ߘ��c1G�V���<=�7��7����6�q�PT��tXԀ�!9*4�4Tހ3XΛex�46���Y��D ����� �BdemDa����\�_l,��G�/���֌7���Y�](�xTt^%�GE�����4�}bT���ڹ�����;Y)���B�Q��u��>J/J �⮶.�XԄ��j�ݳ�+E��d ��r�5�_D�1 ��o�� �B�x�΢�#���<��W�����8���R6�@g�M�.��� dr�D��>(otU��@x=��~v���2� ӣ�d�oBd��3�eO�6�㣷�����ݜ6��6Y��Qz`��S��{���\P�~z m5{J/L��1������<�e�ͅPu�b�]�ϔ���'������f�b� Zpw��c`"��i���BD@:)ִ�:�]��hv�E�w���T�l��P���"Ju�}��وV J��G6��. J/�Qgl߭�e�����@�z�Zev2u�)]կ�����7x���s�M�-<ɯ�c��r�v�����@��$�ޮ}lk���a���'����>x��O\�ZFu>�����ck#��&:��`�$�ai�>2Δ����l���oF[h��lE�ܺ�Πk:)���`�� $[6�����9�����kOw�\|���8}������ބ:��񶐕��I�A1/�=�2[�,�!��.}gN#�u����b��� ~��݊��}34q����d�E��Lc��$��"�[q�U�硬g^��%B �z���r�pJ�ru%v\h1Y�ne`ǥ:g���pQM~�^�Xi� ��`S�:V29.�P���V�?B�k�� AEvw%�_�9C�Q����wKekPؠ�\�;Io d�{ ߞo�c1eP����\� `����E=���@K<�Y���eڼ�J���w����{av�F�'�M�@/J��+9p���|]�����Iw &`��8���&M�hg��[�{��Xj��%��Ӓ�$��(����ʹN���<>�I���RY���K2�NPlL�ɀ)��&e����B+ь����( � �JTx���_?EZ� }@ 6�U���뙢ط�z��dWI�n` D����噥�[��uV��"�G&Ú����2g�}&m��?ċ�"����Om#��������� ��{�ON��"S�X��Ne��ysQ���@Fn��Vg���dX�~nj�]J�<�K]:��FW��b�������62�=��5f����JKw��bf�X�55��~J �%^����:�-�QIE��P��v�nZum� z � ~ə ���� ���ة����;�f��\v���g�8�1��f24;�V���ǔ�)����9���1\��c��v�/'Ƞ�w�������$�4�R-��t���� e�6�/�ġ �̕Ecy�J���u�B���<�W�ַ~�w[B1L۲�-JS΂�{���΃������A��20�c#��@ 0!1@AP"#2Q`$3V�%45a6�FRUq��� ����^7ׅ,$n�������+��F�`��2X'��0vM��p�L=������5��8������u�p~���.�`r�����\���O��,ư�0oS ��_�M�����l���4�kv\JSd���x���SW�<��Ae�IX����������$I���w�:S���y���›R��9�Q[���,�5�;�@]�%���u�@ *ro�lbI �� ��+���%m:�͇ZV�����u�̉����θau<�fc�.����{�4Ա� �Q����*�Sm��8\ujqs]{kN���)qO�y�_*dJ�b�7���yQqI&9�ԌK!�M}�R�;������S�T���1���i[U�ɵz�]��U)V�S6���3$K{�ߊ<�(� E]Զ[ǼENg�����'�\?#)Dkf��J���o��v���'�%ƞ�&K�u�!��b�35LX�Ϸ��63$K�a�;�9>,R��W��3�3� d�JeTYE.Mϧ��-�o�j3+y��y^�c�������VO�9NV\nd�1 ��!͕_)a�v;����թ�M�lWR1��)El��P;��yوÏ�u 3�k�5Pr6<�⒲l�!˞*��u־�n�!�l:����UNW ��%��Chx8vL'��X�@��*��)���̮��ˍ��� ���D-M�+J�U�kvK����+�x8��cY������?�Ԡ��~3mo��|�u@[XeY�C�\Kp�x8�oC�C�&����N�~3-H���� ��MX�s�u<`���~"WL��$8ξ��3���a�)|:@�m�\���^�`�@ҷ)�5p+��6���p�%i)P M���ngc�����#0Aruz���RL+xSS?���ʮ}()#�t��mˇ!��0}}y����<�e� �-ή�Ԩ��X������ MF���ԙ~l L.3���}�V뽺�v�����멬��Nl�)�2����^�Iq��a��M��qG��T�����c3#������3U�Ǎ���}��לS�|qa��ڃ�+���-��2�f����/��bz��ڐ�� �ݼ[2�ç����k�X�2�* �Z�d���J�G����M*9W���s{��w���T��x��y,�in�O�v��]���n����P�$�JB@=4�OTI�n��e�22a\����q�d���%�$��(���:���: /*�K[PR�fr\nڙdN���F�n�$�4�[�� U�zƶ����� �mʋ���,�ao�u 3�z� �x��Kn����\[��VFmbE;�_U��&V�Gg�]L�۪&#n%�$ɯ�dG���D�TI=�%+AB�Ru#��b4�1�»x�cs�YzڙJG��f��Il��d�eF'T� iA��T���uC�$����Y��H?����[!G`}���ͪ� �纤Hv\������j�Ex�K���!���OiƸ�Yj�+u-<���'q����uN�*�r\��+�]���<�wOZ.fp�ێ��,-*)V?j-kÊ#�`�r��dV����(�ݽBk�����G�ƛk�QmUڗe��Z���f}|����8�8��a���i��3'J�����~G_�^���d�8w������ R�`(�~�.��u���l�s+g�bv���W���lGc}��u���afE~1�Ue������Z�0�8�=e�� f@/�jqEKQQ�J��oN��J���W5~M>$6�Lt�;$ʳ{���^��6�{����v6���ķܰg�V�cnn �~z�x�«�,2�u�?cE+Ș�H؎�%�Za�)���X>uW�Tz�Nyo����s���FQƤ��$��*�&�LLXL)�1�" L��eO��ɟ�9=���:t��Z���c��Ž���Y?�ӭV�wv�~,Y��r�ۗ�|�y��GaF�����C�����.�+� ���v1���fήJ�����]�S��T��B��n5sW}y�$��~z�'�c ��8 ��� ,! �p��VN�S��N�N�q��y8z˱�A��4��*��'������2n<�s���^ǧ˭P�Jޮɏ�U�G�L�J�*#��<�V��t7�8����TĜ>��i}K%,���)[��z�21z ?�N�i�n1?T�I�R#��m-�����������������1����lA�`��fT5+��ܐ�c�q՝��ʐ��,���3�f2U�եmab��#ŠdQ�y>\��)�SLY����w#��.���ʑ�f��� ,"+�w�~�N�'�c�O�3F�������N<���)j��&��,-� �љ���֊�_�zS���TǦ����w�>��?�������n��U仆�V���e�����0���$�C�d���rP �m�׈e�Xm�Vu� �L��.�bֹ��� �[Դaզ���*��\y�8�Է:�Ez\�0�Kq�C b��̘��cө���Q��=0Y��s�N��S.���3.���O�o:���#���v7�[#߫ ��5�܎�L���Er4���9n��COWlG�^��0k�%<���ZB���aB_���������'=��{i�v�l�$�uC���mƎҝ{�c㱼�y]���W�i ��ߧc��m�H� m�"�"�����;Y�ߝ�Z�Ǔ�����:S#��|}�y�,/k�Ld� TA�(�AI$+I3��;Y*���Z��}|��ӧO��d�v��..#:n��f>�>���ȶI�TX��� 8��y����"d�R�|�)0���=���n4��6ⲑ�+��r<�O�܂~zh�z����7ܓ�HH�Ga롏���nCo�>������a ���~]���R���̲c?�6(�q�;5%� |�uj�~z8R=X��I�V=�|{v�Gj\gc��q����z�؋%M�ߍ����1y��#��@f^���^�>N�����#x#۹��6�Y~�?�dfPO��{��P�4��V��u1E1J �*|���%���JN��`eWu�zk M6���q t[�� ��g�G���v��WIG��u_ft����5�j�"�Y�:T��ɐ���*�;� e5���4����q$C��2d�}���� _S�L#m�Yp��O�.�C�;��c����Hi#֩%+) �Ӎ��ƲV���SYź��g |���tj��3�8���r|���V��1#;.SQ�A[���S������#���`n�+���$��$I �P\[�@�s��(�ED�z���P��])8�G#��0B��[ى��X�II�q<��9�~[Z멜�Z�⊔IWU&A>�P~�#��dp<�?����7���c��'~���5 ��+$���lx@�M�dm��n<=e�dyX��?{�|Aef ,|n3�<~z�ƃ�uۧ�����P��Y,�ӥQ�*g�#먙R�\���;T��i,��[9Qi歉����c>]9�� ��"�c��P�� �Md?٥��If�ت�u��k��/����F��9�c*9��Ǎ:�ØF���z�n*�@|I�ށ9����N3{'��[�'ͬ�Ҳ4��#}��!�V� Fu��,�,mTIk���v C�7v���B�6k�T9��1�*l� '~��ƞF��lU��'�M ����][ΩũJ_�{�i�I�n��$���L�� j��O�dx�����kza۪��#�E��Cl����x˘�o�����V���ɞ�ljr��)�/,�߬h�L��#��^��L�ф�,íMƁe�̩�NB�L�����iL����q�}��(��q��6IçJ$�W�E$��:������=#����(�K�B����zђ <��K(�N�۫K�w��^O{!����)�H���>x�������lx�?>Պ�+�>�W���,Ly!_�D���Ō�l���Q�!�[ �S����J��1��Ɛ�Y}��b,+�Lo�x�ɓ)����=�y�oh�@�꥟/��I��ѭ=��P�y9��� �ۍYӘ�e+�p�Jnϱ?V\SO%�(�t� ���=?MR�[Ș�����d�/ ��n�l��B�7j� ��!�;ӥ�/�[-���A�>�dN�sLj ��,ɪv��=1c�.SQ�O3�U���ƀ�ܽ�E����������̻��9G�ϷD�7(�}��Ävӌ\�y�_0[w ���<΍>����a_��[0+�L��F.�޺��f�>oN�T����q;���y\��bՃ��y�jH�<|q-eɏ�_?_9+P���Hp$�����[ux�K w�Mw��N�ی'$Y2�=��q���KB��P��~������Yul:�[<����F1�2�O���5=d����]Y�sw:���Ϯ���E��j,_Q��X��z`H1,#II ��d�wr��P˂@�ZJV����y$�\y�{}��^~���[:N����ߌ�U�������O��d�����ؾe��${p>G��3c���Ė�lʌ�� ת��[��`ϱ�-W����dg�I��ig2��� ��}s ��ؤ(%#sS@���~���3�X�nRG�~\jc3�v��ӍL��M[JB�T��s3}��j�Nʖ��W����;7��ç?=X�F=-�=����q�ߚ���#���='�c��7���ڑW�I(O+=:uxq�������������e2�zi+�kuG�R��������0�&e�n���iT^J����~\jy���p'dtG��s����O��3����9* �b#Ɋ�� p������[Bws�T�>d4�ۧs���nv�n���U���_�~,�v����ƜJ1��s�� �QIz��)�(lv8M���U=�;����56��G���s#�K���MP�=��LvyGd��}�VwWBF�'�à �?MH�U�g2�� ����!�p�7Q��j��ڴ����=��j�u��� Jn�A s���uM������e��Ɔ�Ҕ�!)'��8Ϣ�ٔ��ޝ(��Vp���צ֖d=�IC�J�Ǡ{q������kԭ�߸���i��@K����u�|�p=..�*+����x�����z[Aqġ#s2a�Ɗ���RR�)*HRsi�~�a &f��M��P����-K�L@��Z��Xy�'x�{}��Zm+���:�)�) IJ�-i�u���� ���ܒH��'�L(7�y�GӜq���� j��� 6ߌg1�g�o���,kر���tY�?W,���p���e���f�OQS��!K�۟cҒA�|ս�j�>��=⬒��˧L[�� �߿2JaB~R��u�:��Q�] �0H~���]�7��Ƽ�I���(}��cq '�ήET���q�?f�ab���ӥvr� �)o��-Q��_'����ᴎo��K������;��V���o��%���~OK ����*��b�f:���-ťIR��`B�5!RB@���ï�� �u �̯e\�_U�_������� g�ES��3�������QT��a����x����U<~�c?�*�#]�MW,[8O�a�x��]�1bC|踤�P��lw5V%�)�{t�<��d��5���0i�XSU��m:��Z�┵�i�"��1�^B�-��P�hJ��&)O��*�D��c�W��vM��)����}���P��ܗ-q����\mmζZ-l@�}��a��E�6��F�@��&Sg@���ݚ�M����� ȹ 4����#p�\H����dYDo�H���"��\��..R�B�H�z_�/5˘����6��KhJR��P�mƶi�m���3�,#c�co��q�a)*Pt����R�m�k�7x�D�E�\Y�閣_X�<���~�)���c[[�BP����6�Yq���S��0����%_����;��Àv�~�| VS؇ ��'O0��F0��\���U�-�d@�����7�SJ*z��3n��y��P����O���������m�~�P�3|Y��ʉr#�C�<�G~�.,! ���bqx���h~0=��!ǫ�jy����l�O,�[B��~��|9��ٱ����Xly�#�i�B��g%�S��������tˋ���e���ې��\[d�t)��.+u�|1 ������#�~Oj����hS�%��i.�~X���I�H�m��0n���c�1uE�q��cF�RF�o���7� �O�ꮧ� ���ۛ{��ʛi5�rw?׌#Qn�TW��~?y$��m\�\o����%W� ?=>S�N@�� �Ʈ���R����N�)�r"C�:��:����� �����#��qb��Y�. �6[��2K����2u�Ǧ�HYR��Q�MV��� �G�$��Q+.>�����nNH��q�^��� ����q��mM��V��D�+�-�#*�U�̒ ���p욳��u:�������IB���m���PV@O���r[b= �� ��1U�E��_Nm�yKbN�O���U�}�the�`�|6֮P>�\2�P�V���I�D�i�P�O;�9�r�mAHG�W�S]��J*�_�G��+kP�2����Ka�Z���H�'K�x�W�MZ%�O�YD�Rc+o��?�q��Ghm��d�S�oh�\�D�|:W������UA�Qc yT�q������~^�H��/��#p�CZ���T�I�1�ӏT����4��"�ČZ�����}��`w�#�*,ʹ�� ��0�i��課�Om�*�da��^gJ݅{���l�e9uF#T�ֲ��̲�ٞC"�q���ߍ ոޑ�o#�XZTp����@ o�8��(jd��xw�]�,f���`~�|,s��^����f�1���t��|��m�򸄭/ctr��5s��7�9Q�4�H1꠲BB@l9@���C�����+�wp�xu�£Yc�9��?`@#�o�mH�s2��)�=��2�.�l����jg�9$�Y�S�%*L������R�Y������7Z���,*=�䷘$�������arm�o�ϰ���UW.|�r�uf����IGw�t����Zwo��~5 ��YյhO+=8fF�)�W�7�L9lM�̘·Y���֘YLf�큹�pRF���99.A �"wz��=E\Z���'a� 2��Ǚ�#;�'}�G���*��l��^"q��+2FQ� hj��kŦ��${���ޮ-�T�٭cf�|�3#~�RJ����t��$b�(R��(����r���dx� >U b�&9,>���%E\� Ά�e�$��'�q't��*�א���ެ�b��-|d���SB�O�O��$�R+�H�)�܎�K��1m`;�J�2�Y~9��O�g8=vqD`K[�F)k�[���1m޼c��n���]s�k�z$@��)!I �x՝"v��9=�ZA=`Ɠi �:�E��)`7��vI��}d�YI�_ �o�:ob���o ���3Q��&D&�2=�� �Ά��;>�h����y.*ⅥS������Ӭ�+q&����j|UƧ����}���J0��WW< ۋS�)jQR�j���Ư��rN)�Gű�4Ѷ(�S)Ǣ�8��i��W52���No˓� ۍ%�5brOn�L�;�n��\G����=�^U�dI���8$�&���h��'���+�(������cȁ߫k�l��S^���cƗjԌE�ꭔ��gF���Ȓ��@���}O���*;e�v�WV���YJ\�]X'5��ղ�k�F��b 6R�o՜m��i N�i����>J����?��lPm�U��}>_Z&�KK��q�r��I�D�Չ~�q�3fL�:S�e>���E���-G���{L�6p�e,8��������QI��h��a�Xa��U�A'���ʂ���s�+טIjP�-��y�8ۈZ?J$��W�P� ��R�s�]��|�l(�ԓ��sƊi��o(��S0��Y� 8�T97.�����WiL��c�~�dxc�E|�2!�X�K�Ƙਫ਼�$((�6�~|d9u+�qd�^3�89��Y�6L�.I�����?���iI�q���9�)O/뚅����O���X��X�V��ZF[�یgQ�L��K1���RҖr@v�#��X�l��F���Нy�S�8�7�kF!A��sM���^rkp�jP�DyS$N���q��nxҍ!U�f�!eh�i�2�m���`�Y�I�9r�6� �TF���C}/�y�^���Η���5d�'��9A-��J��>{�_l+�`��A���[�'��յ�ϛ#w:݅�%��X�}�&�PSt�Q�"�-��\縵�/����$Ɨh�Xb�*�y��BS����;W�ջ_mc�����vt?2}1�;qS�d�d~u:2k5�2�R�~�z+|HE!)�Ǟl��7`��0�<�,�2*���Hl-��x�^����'_TV�gZA�'j� ^�2Ϊ��N7t�����?w�� �x1��f��Iz�C-Ȗ��K�^q�;���-W�DvT�7��8�Z�������� hK�(P:��Q- �8�n�Z���܃e貾�<�1�YT<�,�����"�6{/ �?�͟��|1�:�#g��W�>$����d��J��d�B��=��jf[��%rE^��il:��B���x���Sּ�1հ��,�=��*�7 fcG��#q� �eh?��2�7�����,�!7x��6�n�LC�4x��},Geǝ�tC.��vS �F�43��zz\��;QYC,6����~;RYS/6���|2���5���v��T��i����������mlv��������&� �nRh^ejR�LG�f���? �ۉҬܦƩ��|��Ȱ����>3����!v��i�ʯ�>�v��オ�X3e���_1z�Kȗ\<������!�8���V��]��?b�k41�Re��T�q��mz��TiOʦ�Z��Xq���L������q"+���2ۨ��8}�&N7XU7Ap�d�X��~�׿��&4e�o�F��� �H����O���č�c�� 懴�6���͉��+)��v;j��ݷ�� �UV�� i��� j���Y9GdÒJ1��詞�����V?h��l����l�cGs�ځ�������y�Ac�����\V3�? �� ܙg�>qH�S,�E�W�[�㺨�uch�⍸�O�}���a��>�q�6�n6����N6�q������N ! 1AQaq�0@����"2BRb�#Pr���3C`��Scst���$4D���%Td�� ?���N����a��3��m���C���w��������xA�m�q�m���m������$����4n淿t'��C"w��zU=D�\R+w�p+Y�T�&�պ@��ƃ��3ޯ?�Aﶂ��aŘ���@-�����Q�=���9D��ռ�ѻ@��M�V��P��܅�G5�f�Y<�u=,EC)�<�Fy'�"�&�չ�X~f��l�KԆV��?�� �W�N����=(� �;���{�r����ٌ�Y���h{�١������jW����P���Tc�����X�K�r��}���w�R��%��?���E��m�� �Y�q|����\lEE4���r���}�lsI�Y������f�$�=�d�yO����p�����yBj8jU�o�/�S��?�U��*������ˍ�0������u�q�m [�?f����a�� )Q�>����6#������� ?����0UQ����,IX���(6ڵ[�DI�MNލ�c&���υ�j\��X�R|,4��� j������T�hA�e��^���d���b<����n�� �즇�=!���3�^�`j�h�ȓr��jẕ�c�,ٞX����-����a�ﶔ���#�$��]w�O��Ӫ�1y%��L�Y<�wg#�ǝ�̗`�x�xa�t�w��»1���o7o5��>�m뭛C���Uƃߜ}�C���y1Xνm�F8�jI���]����H���ۺиE@I�i;r�8ӭ����V�F�Շ| ��&?�3|x�B�MuS�Ge�=Ӕ�#BE5G�����Y!z��_e��q�р/W>|-�Ci߇�t�1ޯќd�R3�u��g�=0 5��[?�#͏��q�cf���H��{ ?u�=?�?ǯ���}Z��z���hmΔ�BFTW�����<�q�(v� ��!��z���iW]*�J�V�z��gX֧A�q�&��/w���u�gYӘa���; �i=����g:��?2�dž6�ى�k�4�>�Pxs����}������G�9��3 ���)gG�R<>r h�$��'nc�h�P��Bj��J�ҧH� -��N1���N��?��~��}-q!=��_2hc�M��l�vY%UE�@|�v����M2�.Y[|y�"Eï��K�ZF,�ɯ?,q�?v�M 80jx�"�;�9vk�����+ ֧�� �ȺU��?�%�vcV��mA�6��Qg^M����A}�3�nl� QRN�l8�kkn�'�����(��M�7m9و�q���%ޟ���*h$Zk"��$�9��: �?U8�Sl��,,|ɒ��xH(ѷ����Gn�/Q�4�P��G�%��Ա8�N��!� �&�7�;���eKM7�4��9R/%����l�c>�x;������>��C�:�����t��h?aKX�bhe�ᜋ^�$�Iհ �hr7%F$�E��Fd���t��5���+�(M6�t����Ü�UU|zW�=a�Ts�Tg������dqP�Q����b'�m���1{|Y����X�N��b �P~��F^F:����k6�"�j!�� �I�r�`��1&�-$�Bevk:y���#yw��I0��x��=D�4��tU���P�ZH��ڠ底taP��6����b>�xa����Q�#� WeF��ŮNj�p�J* mQ�N����*I�-*�ȩ�F�g�3 �5��V�ʊ�ɮ�a��5F���O@{���NX��?����H�]3��1�Ri_u��������ѕ�� ����0��� F��~��:60�p�͈�S��qX#a�5>���`�o&+�<2�D����: �������ڝ�$�nP���*)�N�|y�Ej�F�5ټ�e���ihy�Z �>���k�bH�a�v��h�-#���!�Po=@k̆IEN��@��}Ll?j�O������߭�ʞ���Q|A07x���wt!xf���I2?Z��<ץ�T���cU�j��]��陎Ltl �}5�ϓ��$�,��O�mˊ�;�@O��jE��j(�ا,��LX���LO���Ц�90�O �.����a��nA���7������j4 ��W��_ٓ���zW�jcB������y՗+EM�)d���N�g6�y1_x��p�$Lv:��9�"z��p���ʙ$��^��JԼ*�ϭ����o���=x�Lj�6�J��u82�A�H�3$�ٕ@�=Vv�]�'�qEz�;I˼��)��=��ɯ���x �/�W(V���p�����$ �m�������u�����񶤑Oqˎ�T����r��㠚x�sr�GC��byp�G��1ߠ�w e�8�$⿄����/�M{*}��W�]˷.�CK\�ުx���/$�WPw���r� |i���&�}�{�X� �>��$-��l���?-z���g����lΆ���(F���h�vS*���b���߲ڡn,|)mrH[���a�3�ר�[1��3o_�U�3�TC�$��(�=�)0�kgP���� ��u�^=��4 �WYCҸ:��vQ�ר�X�à��tk�m,�t*��^�,�}D*� �"(�I��9R����>`�`��[~Q]�#af��i6l��8���6�:,s�s�N6�j"�A4���IuQ��6E,�GnH��zS�HO�uk�5$�I�4��ؤ�Q9�@��C����wp�BGv[]�u�Ov���0I4���\��y�����Q�Ѹ��~>Z��8�T��a��q�ޣ;z��a���/��S��I:�ܫ_�|������>=Z����8:�S��U�I�J��"IY���8%b8���H��:�QO�6�;7�I�S��J��ҌAά3��>c���E+&jf$eC+�z�;��V����� �r���ʺ������my�e���aQ�f&��6�ND��.:��NT�vm�<- u���ǝ\MvZY�N�NT��-A�>jr!S��n�O 1�3�Ns�%�3D@���`������ܟ 1�^c<���� �a�ɽ�̲�Xë#�w�|y�cW�=�9I*H8�p�^(4���՗�k��arOcW�tO�\�ƍR��8����'�K���I�Q�����?5�>[�}��yU�ײ -h��=��% q�ThG�2�)���"ו3]�!kB��*p�FDl�A���,�eEi�H�f�Ps�����5�H:�Փ~�H�0Dت�D�I����h�F3�������c��2���E��9�H��5�zԑ�ʚ�i�X�=:m�xg�hd(�v����׊�9iS��O��d@0ڽ���:�p�5�h-��t�&���X�q�ӕ,��ie�|���7A�2���O%P��E��htj��Y1��w�Ѓ!����  ���� ࢽ��My�7�\�a�@�ţ�J �4�Ȼ�F�@o�̒?4�wx��)��]�P��~�����u�����5�����7X ��9��^ܩ�U;Iꭆ 5 �������eK2�7(�{|��Y׎ �V��\"���Z�1� Z�����}��(�Ǝ"�1S���_�vE30>���p;� ΝD��%x�W�?W?v����o�^V�i�d��r[��/&>�~`�9Wh��y�;���R��� ;;ɮT��?����r$�g1�K����A��C��c��K��l:�'��3 c�ﳯ*"t8�~l��)���m��+U,z��`(�>yJ�?����h>��]��v��ЍG*�{`��;y]��I�T� ;c��NU�fo¾h���/$���|NS���1�S�"�H��V���T���4��uhǜ�]�v;���5�͠x��'C\�SBpl���h}�N����� A�Bx���%��ޭ�l��/����T��w�ʽ]D�=����K���ž�r㻠l4�S�O?=�k �M:� ��c�C�a�#ha���)�ѐxc�s���gP�iG��{+���x���Q���I= �� z��ԫ+ �8"�k�ñ�j=|����c ��y��CF��/��*9ж�h{ �?4�o� ��k�m�Q�N�x��;�Y��4膚�a�w?�6�>e]�����Q�r�:����g�,i"�����ԩA�*M�<�G��b�if��l^M��5� �Ҩ�{����6J��ZJ�����P�*�����Y���ݛu�_4�9�I8�7���������,^ToR���m4�H��?�N�S�ѕw��/S��甍�@�9H�S�T��t�ƻ���ʒU��*{Xs�@����f�����֒Li�K{H�w^���������Ϥm�tq���s� ���ք��f:��o~s��g�r��ט� �S�ѱC�e]�x���a��) ���(b-$(�j>�7q�B?ӕ�F��hV25r[7 Y� }L�R��}����*sg+��x�r�2�U=�*'WS��ZDW]�WǞ�<��叓���{�$�9Ou4��y�90-�1�'*D`�c�^o?(�9��u���ݐ��'PI&� f�Jݮ�������:wS����jfP1F:X �H�9dԯ���˝[�_54 �}*;@�ܨ�� ð�yn�T���?�ןd�#���4rG�ͨ��H�1�|-#���Mr�S3��G�3�����)�.᧏3v�z֑��r����$G"�`j �1t��x0<Ɔ�Wh6�y�6��,œ�Ga��gA����y��b��)��h�D��ß�_�m��ü �gG;��e�v��ݝ�nQ� ��C����-�*��o���y�a��M��I�>�<���]obD��"�:���G�A��-\%LT�8���c�)��+y76���o�Q�#*{�(F�⽕�y����=���rW�\p���۩�c���A���^e6��K������ʐ�cVf5$�'->���ՉN"���F�"�UQ@�f��Gb~��#�&�M=��8�ט�JNu9��D��[̤�s�o�~������ G��9T�tW^g5y$b��Y'��س�Ǵ�=��U-2 #�MC�t(�i� �lj�@Q 5�̣i�*�O����s�x�K�f��}\��M{E�V�{�υ��Ƈ�����);�H����I��fe�Lȣr�2��>��W�I�Ȃ6������i��k�� �5�YOxȺ����>��Y�f5'��|��H+��98pj�n�.O�y�������jY��~��i�w'������l�;�s�2��Y��:'lg�ꥴ)o#'Sa�a�K��Z� �m��}�`169�n���"���x��I ��*+� }F<��cГ���F�P�������ֹ*�PqX�x۩��,� ��N�� �4<-����%����:��7����W���u�`����� $�?�I��&����o��o��`v�>��P��"��l���4��5'�Z�gE���8���?��[�X�7(��.Q�-��*���ތL@̲����v��.5���[��=�t\+�CNܛ��,g�SQnH����}*F�G16���&:�t��4ُ"A��̣��$�b �|����#rs��a�����T�� ]�<�j��BS�('$�ɻ� �wP;�/�n��?�ݜ��x�F��yUn�~mL*-�������Xf�wd^�a�}��f�,=t�׵i�.2/wpN�Ep8�OР���•��R�FJ� 55TZ��T �ɭ�<��]��/�0�r�@�f��V��V����Nz�G��^���7hZi����k��3�,kN�e|�vg�1{9]_i��X5y7� 8e]�U����'�-2,���e"����]ot�I��Y_��n�(JҼ��1�O ]bXc���Nu�No��pS���Q_���_�?i�~�x h5d'�(qw52] ��'ޤ�q��o1�R!���`ywy�A4u���h<קy���\[~�4�\ X�Wt/� 6�����n�F�a8��f���z �3$�t(���q��q�x��^�XWeN'p<-v�!�{�(>ӽDP7��ո0�y)�e$ٕv�Ih'Q�EA�m*�H��RI��=:��� ���4牢) �%_iN�ݧ�l]� �Nt���G��H�L��� ɱ�g<���1V�,�J~�ٹ�"K��Q�� 9�HS�9�?@��k����r�;we݁�]I�!{ �@�G�[�"��`���J:�n]�{�cA�E����V��ʆ���#��U9�6����j�#Y�m\��q�e4h�B�7��C�������d<�?J����1g:ٳ���=Y���D�p�ц� ׈ǔ��1�]26؜oS�'��9�V�FVu�P�h�9�xc�oq�X��p�o�5��Ա5$�9W�V(�[Ak�aY錎qf;�'�[�|���b�6�Ck��)��#a#a˙��8���=äh�4��2��C��4tm^ �n'c���]GQ$[Wҿ��i���vN�{Fu ��1�gx��1┷���N�m��{j-,��x�� Ūm�ЧS�[�s���Gna���䑴�� x�p 8<������97�Q���ϴ�v�aϚG��Rt�Һ׈�f^\r��WH�JU�7Z���y)�vg=����n��4�_)y��D'y�6�]�c�5̪�\� �PF�k����&�c;��cq�$~T�7j ���nç]�<�g ":�to�t}�159�<�/�8������m�b�K#g'I'.W�����6��I/��>v��\�MN��g���m�A�yQL�4u�Lj�j9��#44�t��l^�}L����n��R��!��t��±]��r��h6ٍ>�yҏ�N��fU�� ���� Fm@�8}�/u��jb9������he:A�y�ծw��GpΧh�5����l}�3p468��)U��d��c����;Us/�֔�YX�1�O2��uq�s��`hwg�r~�{ R��mhN��؎*q 42�*th��>�#���E����#��Hv�O����q�}�����6�e��\�,Wk�#���X��b>��p}�դ��3���T5��†��6��[��@�P�y*n��|'f�֧>�lư΂�̺����SU�'*�q�p�_S�����M�� '��c�6�����m�� ySʨ;M��r���Ƌ�m�Kxo,���Gm�P��A�G�:��i��w�9�}M(�^�V��$ǒ�ѽ�9���|���� �a����J�SQ�a���r�B;����}���ٻ֢�2�%U���c�#�g���N�a�ݕ�'�v�[�OY'��3L�3�;,p�]@�S��{ls��X�'���c�jw�k'a�.��}�}&�� �dP�*�bK=ɍ!����;3n�gΊU�ߴmt�'*{,=SzfD� A��ko~�G�aoq�_mi}#�m�������P�Xhύ����mxǍ�΂���巿zf��Q���c���|kc�����?���W��Y�$���_Lv����l߶��c���`?����l�j�ݲˏ!V��6����U�Ђ(A���4y)H���p�Z_�x��>���e��R��$�/�`^'3qˏ�-&Q�=?��CFVR �D�fV�9��{�8g�������n�h�(P"��6�[�D���< E�����~0<@�`�G�6����Hг�cc�� �c�K.5��D��d�B���`?�XQ��2��ٿyqo&+�1^� DW�0�ꊩ���G�#��Q�nL3��c���������/��x ��1�1[y�x�პCW��C�c�UĨ80�m�e�4.{�m��u���I=��f�����0QRls9���f���������9���~f�����Ǩ��a�"@�8���ȁ�Q����#c�ic������G��$���G���r/$W�(��W���V�"��m�7�[m�A�m����bo��D� j����۳� l���^�k�h׽����� ��#� iXn�v��eT�k�a�^Y�4�BN��ĕ��0 !01@Q"2AaPq3BR������?���@4�Q�����T3,���㺠�W�[=JK�Ϟ���2�r^7��vc�:�9 �E�ߴ�w�S#d���Ix��u��:��Hp��9E!�� V 2;73|F��9Y���*ʬ�F��D����u&���y؟��^EA��A��(ɩ���^��GV:ݜDy�`��Jr29ܾ�㝉��[���E;Fzx��YG��U�e�Y�C���� ����v-tx����I�sם�Ę�q��Eb�+P\ :>�i�C'�;�����k|z�رn�y]�#ǿb��Q��������w�����(�r|ӹs��[�D��2v-%��@;�8<a���[\o[ϧw��I!��*0�krs)�[�J9^��ʜ��p1)� "��/_>��o��<1����A�E�y^�C��`�x1'ܣn�p��s`l���fQ��):�l����b>�Me�jH^?�kl3(�z:���1ŠK&?Q�~�{�ٺ�h�y���/�[��V�|6��}�KbX����mn[-��7�5q�94�������dm���c^���h� X��5��<�eޘ>G���-�}�دB�ޟ� ��|�rt�M��V+�]�c?�-#ڛ��^ǂ}���Lkr���O��u�>�-D�ry� D?:ޞ�U��ǜ�7�V��?瓮�"�#���r��չģVR;�n���/_� ؉v�ݶe5d�b9��/O��009�G���5n�W����JpA�*�r9�>�1��.[t���s�F���nQ� V 77R�]�ɫ8����_0<՜�IF�u(v��4��F�k�3��E)��N:��yڮe��P�`�1}�$WS��J�SQ�N�j�ٺ��޵�#l���ј(�5=��5�lǏmoW�v-�1����v,W�mn��߀$x�<����v�j(����c]��@#��1������Ǔ���o'��u+����;G�#�޸��v-lη��/(`i⣍Pm^���ԯ̾9Z��F��������n��1��� ��]�[��)�'������:�֪�W��FC����� �B9،!?���]��V��A�Վ�M��b�w��G F>_DȬ0¤�#�QR�[V��kz���m�w�"��9ZG�7'[��=�Q����j8R?�zf�\a�=��O�U����*oB�A�|G���2�54 �p��.w7� �� ��&������ξxGHp� B%��$g�����t�Џ򤵍z���HN�u�Я�-�'4��0��;_��3 !01"@AQa2Pq#3BR������?��ʩca��en��^��8���<�u#��m*08r��y�N"�<�Ѳ0��@\�p��� �����Kv�D��J8�Fҽ� �f�Y��-m�ybX�NP����}�!*8t(�OqѢ��Q�wW�K��ZD��Δ^e��!� ��B�K��p~�����e*l}z#9ң�k���q#�Ft�o��S�R����-�w�!�S���Ӥß|M�l޶V��!eˈ�8Y���c�ЮM2��tk���� ������J�fS����Ö*i/2�����n]�k�\���|4yX�8��U�P.���Ы[���l��@"�t�<������5�lF���vU�����W��W��;�b�cД^6[#7@vU�xgZv��F�6��Q,K�v��� �+Ъ��n��Ǣ��Ft���8��0��c�@�!�Zq s�v�t�;#](B��-�nῃ~���3g������5�J�%���O������n�kB�ĺ�.r��+���#�N$?�q�/�s�6��p��a����a��J/��M�8��6�ܰ"�*������ɗud"\w���aT(����[��F��U՛����RT�b���n�*��6���O��SJ�.�ij<�v�MT��R\c��5l�sZB>F��<7�;EA��{��E���Ö��1U/�#��d1�a�n.1ě����0�ʾR�h��|�R��Ao�3�m3 ��%�� ���28Q� ��y��φ���H�To�7�lW>����#i`�q���c����a��� �m,B�-j����݋�'mR1Ήt�>��V��p���s�0IbI�C.���1R�ea�����]H�6����������4B>��o��](��$B���m�����a�!=��?�B� K�Ǿ+�Ծ"�n���K��*��+��[T#�{E�J�S����Q�����s�5�:�U�\wĐ�f�3����܆&�)����I���Ԇw��E T�lrTf6Q|R�h:��[K�� �z��c֧�G�C��%\��_�a�84��HcO�bi��ؖV��7H �)*ģK~Xhչ0��4?�0��� �E<���}3���#���u�?�� ��|g�S�6ꊤ�|�I#Hڛ� �ա��w�X��9��7���Ŀ%�SL��y6č��|�F�a 8���b��$�sק�h���b9RAu7�˨p�Č�_\*w��묦��F ����4D~�f����|(�"m���NK��i�S�>�$d7SlA��/�²����SL��|6N�}���S�˯���g��]6��; �#�.��<���q'Q�1|KQ$�����񛩶"�$r�b:���N8�w@��8$�� �AjfG|~�9F ���Y��ʺ��Bwؒ������M:I岎�G��`s�YV5����6��A �b:�W���G�q%l�����F��H���7�������Fsv7��k�� 403WebShell
403Webshell
Server IP : 172.67.215.126  /  Your IP : 172.69.214.108
Web Server : Apache/2.4.52 (Ubuntu)
System : Linux ip-172-31-19-221 6.8.0-1029-aws #31~22.04.1-Ubuntu SMP Thu Apr 24 21:16:18 UTC 2025 x86_64
User : www-data ( 33)
PHP Version : 8.1.28
Disable Function : NONE
MySQL : OFF  |  cURL : ON  |  WGET : ON  |  Perl : ON  |  Python : OFF  |  Sudo : ON  |  Pkexec : ON
Directory :  /efsdata/scitechnol.com/httpdocs/submission/uploads/

Upload File :
current_dir [ Writeable ] document_root [ Writeable ]

 

Command :


[ Back ]     

Current File : /efsdata/scitechnol.com/httpdocs/submission/uploads/2248-1-Manuscript-2014-09-04.doc
��ࡱ�>��	or����n��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������	��]dbjbj��	Tfr�r��6]���������PP����������8�L8L��/0�(�(���###1/3/3/3/3/3/3/$1��3BW/9�#�""###W/PP��%�/a+a+a+#FP8���1/a+#1/a+a+:m.,��.������]�������a)v�.
/�/0�/�.
�3�)��3�.�3��.p##a+#####W/W/a+###�/####���������������������������������������������������������������������3#########� :	Tissue Specific In-Silico Mining of Single Nucleotide Polymorphisms (SNPs) from Expressed Sequence Tags (ESTs) in Livestock Species

Neeraj Kumar Dhaliwal, Aruna Pandey, Avnish Kumar Bhatia1, Birham Prakash
ICAR - National Bureau of Animal Genetic Resources, Karnal � 13200, India
Abstract
Tissue specific Single nucleotide polymorphisms (SNPs) hold significance as potential expressed Quantitative Trait Loci (eQTL). Although there have been numerous studies for mining SNPs in livestock species, there is little focus on discovery of tissue-specific SNPs. We performed tissue specific in-silico SNP mining from Expressed Sequence Tags (ESTs) in two livestock species - pig and cattle. EST data for tissues such as skin, liver, spleen, intestine and mammary gland for the two species were downloaded from NCBI website. ESTs were pre-processed using the online tool EGassembler and assembled into contigs using CAP3 program. SNPs were predicted from contigs using QualitySNP tool. Contigs were searched in the genome assembly of a species using Blat tool in UCSC genome browser. Perl scripts were written to find genomic position of SNPs from the alignment of contigs with the genomic segments, and to find availability of predicted SNPs in the dbSNP database. A database of tissue specific SNPs was developed. 
Keywords: EST; SNP; Tissue-specific; Livestock; eQTL.
Introduction 
Expressed Sequence Tags (ESTs) are partial sequences of complementary DNA (cDNA) clones measuring several hundred nucleotides [1]. In recent years, there have been voluminous increases in EST data generation and submission, especially for livestock species, to the primary databases such as NCBI, DDBJ and EMBL. 
Single nucleotide polymorphisms (SNPs) are the simplest type of genomic variation. Over the past decade, SNPs have been the genetic markers of choice due to their high density, stability and the highly automated techniques for their detection [2]. Thousands of potentially informative SNP markers can be identified for the development of high density SNP maps [3], which are an essential resource to identify genes responsible for the variation of complex traits or Quantitative Traits Loci (QTL)  [4, 5]. SNP analysis provides an important tool in applications such as genetic linkage mapping, fine mapping of candidate regions and to determine haplotypes associated with traits of interest [6]. With the availability of genome sequence assembly of a number of livestock species like cow, sheep, chicken, pig and horse, mining of sequence data for SNPs is a major task for researchers. Huge amount of EST data for livestock species- pig and cattle on different tissues like skin, mammary gland, spleen, liver, intestine etc. are available in public databases. ESTs data allow discovery of SNPs in the transcribed regions [7].
There are few studies showing importance of tissue-specific SNPs, particularly in species of economic importance such as livestock species. In a study of Tissue Specific Temporal (TST) exome capture, presence of tissue (muscle) specific genes and SNPs in Bubalus bubalis has been revealed [8]. Recent Genome Wide Association Studies (GWAS) in respect to humans have revealed that the genetic variants may be operating in tissue dependent manner. Subsets of genetic polymorphisms show a statistical association with transcript expression levels, and have therefore been called as expression quantitative trait loci (eQTLs) [9]. 
In the present study we have used a bioinformatics pipeline for in-silico tissue specific SNP mining from EST data in pig and cattle. Discovered SNPs have been validated by revealing their availability in dbSNP database.  A database of tissue wise SNPs for livestock species have also been developed with additional information on genes.
Methods
EST data processing
EST data for different tissues of pig and cattle were downloaded from dbEST database available at NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov/nucest). ESTs needs processing to remove low quality DNA sequences, contaminating sequences such as vector sequences and repetitive sequences [10]. The preprocessing was performed using online tool EGassembler [11], which performs sequence cleaning, repeats masking and vector cleaning as a single operation. The Repbase repeats library for the respective species was selected as repeats library to remove repetitive sequences and NCBI core vector library was chosen for vector masking process. Processed ESTs were free from low quality sequences, poly A/ poly T tail, repetitive sequences and the vector sequences.
ESTs were assembled in contigs using the cluster assembly program CAP3 [12] using default parameters, which performs clustering or assembly of the sequences into contigs by pairwise sequence similarity searches between sequences.
SNP Identification
Contigs were analyzed for SNPs using SNP prediction tool QualitySNP [13] with default parameters. This tool takes the contigs.ace file generated by CAP3 tool as input and predicts SNPs on contigs. SNPs predicted by the tool are differentiated into three categories, viz., potential SNPs, High Quality SNPs and Reliable SNPs. It provides position of SNPs on contigs, number of SNPs on each contig, major and minor alleles and d-value denoting the standard deviation of normalized number of SNPs per haplotype, which identify clusters that probably contains paralogs.
SNPs position on chromosome and availability in dbSNP Database
Contigs with potential SNPs were searched in the genome assembly of a species in UCSC Genome Browser using BLAT tool (http://genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgBlat?command=start). This tool provides alignment of the contig with particular chromosome segment of a species. 
SNPs data of these species were downloaded from the Ensembl Genome Browser (http://asia.ensembl.org/biomart/martview/), which included SNP name, SNP type, chromosome name, chromosome position, chromosome strand, SNP alleles, Ensembl gene id, gene name, gene start, and gene end positions. SNP data were retrieved separately for each chromosome for these two species for ease of data handling on a computer. 
 Perl script was written to find position of SNPs in the best alignment of contigs and the genomic sequences as obtained using the BLAT tool. These SNPs were searched for their presence in the dbSNP database available in the Ensembl Biomart (http://asia.ensembl.org/biomart/martview/). The perl script is available for download within online database described in the Section 3. Results. 
Database Development
A database on Tissue-wise SNPs mined from ESTs was developed using MySQL and PHP to provide user-friendly interface on tissue wise SNPs and their availability in dbSNP database. SNPs data in text files was inserted into the database using a perl script. Information on chromosomes and genes were also inserted in the database. 
Results
Table-1 displays information of ESTs and SNPs discovered in pig and cattle. There were 50410 ESTs in dbEST database for skin tissue of pig. Assembly of these ESTs provided 6476 contigs and a total of 3444 SNPs were identified out of which 1550 were high quality SNPs and 834 were reliable SNPs. Only 421 out of 3444 detected SNPs were found in dbSNP database. 
The database developed on tissue-wise SNPs provides a user-friendly web interface for data query and visualization on search terms such as species name, tissue name, chromosome name and gene name. Output field settings include dbSNP name, gene name, chromosome name, contig name and sequence. SNPs are retrived with information on high quality SNPs, reliable SNPs, Blat strand, dbSNP strand, dbSNP id, dbSNP allele, contig allele, contig name and sequence. The database also provides genomic information such as Ensembl gene id, Ensembl gene name, gene start position, gene end position, chromosome name and position of SNP on chromosome. Information on tissue-wise SNPs is linked to other databases such as Ensembl genome browser and dbSNP database. The database is accessible through a link �Database� available at the website http://www.nabgr.res.in/.
Discussion
Significance of tissue specific SNPs, genes and eQTLs has been highlighted recently in humans [14, 15, 16]. Tissue specific SNPs have also been studied in case of Bubalis bubalus, where genome assembly is yet unknown [8]. In these studies, effects of genetic variants have been reported in which 69 to 80% of the regulatory variants are operating in cell-specific manner. Also eQTLs have been identified, which may be unique or shared among cell types or tissues [14, 15]. Many tissues and cell types have specific gene expression patterns and so it is not clear how frequently eQTLs found in one tissue type will be replicated in others. Therefore, tissue specific studies using SNPs to detect eQTLs have been taken up. A unique set of tissue specific eQTLs have been identified in blood and brain tissues in humans [15]. Nicolae et al. [9] showed that SNPs associated with complex traits are more likely to be eQTLs than minor-allele-frequency matched SNPs from GWAS. In view of these studies, tissue specific SNP mining should be of considerable value in the livestock species. 
We have performed tissue specific in-silico SNP mining from EST data in two agriculturally important livestock species - pig and cattle. These SNPs were mined from EST data retrieved for a tissue and therefore the SNPs discovered should be specific to the tissue. These SNPs were then located on the genome assembly of the respective species and validated by searching in the dbSNP database. 
Conclusion 
The present study reports a bioinformatics pipeline for in-silico tissue-specific SNP mining from EST data in pig and cattle, locating these SNPs on the genome assembly of the respective species, and searching their availability in dbSNP database using perl script. A number of potential SNPs were discovered in the two investigated livestock species-pig and cattle using the approach. A database of tissue-specific SNPs has also been developed for use by researchers. 
Taking into consideration recent emphasis on tissue specific SNPs and genes, this study in two agriculturally significant livestock species, is of considerable importance. As tissue specific SNPs hold significance as potential eQTL, this pipeline can be applied to other species where genome assembly is available.
Acknowledgments
Authors thankfully acknowledge funding by Indian Council of Agricultural Research through National Agricultural Innovation Project.

References
Baxevanis AD and Ouellette BFF (2001) Bioinformatics: A Practical Guide to Analysis of Genes and Proteins. Second edition. John Wiley & Sons Inc. New York.
Kerstens HD, Kollers S, Kommadath A, Dibbits B, Kinders SM, et al. (2009) Mining for single nucleotide polymorphisms in pig genome sequence data. BMC Genomics, 10: 4.
Zimdahl H, Nyakatura G, Brandt P, Schulz H,�Hummel O, et al. (2004) A SNP map of the rat genome generated from cDNA sequences. Science, 303 (5659): 807.
Andersson L (2001) Genetic dissection of phenotypic diversity in farm animals. Nature Reviews Genetics, 2:130-38.
Andersson L and Georges M (2004) Domestic animal genomics: Deciphering the genetics of complex traits. Nature Reviews Genetics, 5: 202-12.
Panitz F, Stengaard H, Hornshoj H, Gorodkin J, Hedegaard J, et al. (2007) SNP mining porcine EST with MAVIANT, a novel tool for SNP evaluation and annotation. Bioinformatics, 23 (13): i387 - i391.
Marth GT (2003) Computational SNP discovery in DNA sequence data. Methods in Molecular Biology, 212: 85-110.
Jakhesara SJ, Ahir VB, Padiya KB, Koringa PG, Rank DN, and Joshi CG. (2012) Tissue-specific temporal exome capture revealed muscle-specific genes and SNPs in Indian buffalo Bubalus bubalis. Genomics, Proteomics & Bioinformatics, 10(2):107-13.
Nicolae DL, Gamazon E, Zhang W, Duan S, Dolan ME, et al. (2010) Trait-associated SNPs are more likely to be eQTLs: annotation to enhance discovery from GWAS. PLoS Genetics 6(4): e1000888.
Chou HH and Holmes MH (2001) DNA sequence quality trimming and vector removal. Bioinformatics: 17(12): 1093-1104.
Masoudi-Nejad A, Tonomura K, Kawashima S, Moriya Y, Suzuki M, et al. (2006) EGassembler: online bioinformatics service for large-scale processing, clustering and assembling ESTs and genomic DNA fragments. Nucleic Acids Res, 34: W459-62.
Huang X, Madan A. (1999) CAP3: A DNA sequence assembly program. Genome Research, 9: 868-77.
Tang J, Vosman B, Voorrips RE, van der Linden CG, Leunissen JA. (2006) QualitySNP: a pipeline for detecting single nucleotide polymorphisms and insertions/deletions in EST data from diploid and polyploid species. BMC Bioinformatics, 7: 438.
Dimas AS, Deutsch S, Stranger BE, Montgomery SB, Borel C, et al. (2009) Common regulatory variation impacts gene expression in a cell type dependent manner. Science, 325 (5945): 1246-50.
Nica AC, Parts L, Glass D, Nisbet J, Barrett A, et al. (2011) The architecture of gene regulatory variation across multiple human tissues: The MuTHER Study. PLoS Genetics, 7(2): e1002003.
Hernandez DG, Nalls MA, Moore M,  HYPERLINK "http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Chong%20S%5Bauth%5D" Chong S,  HYPERLINK "http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Dillman%20A%5Bauth%5D" Dillman A, et al. (2012) Integration of GWAS SNPs and tissue speci�c expression pro�ling reveal discrete eQTLs for human traits in blood and brain. Neurobiology of Disease, 47(1): 20-28.


Table-1: Tissue wise SNPs from ESTs in pig and cattle species.
Livestock speciesTissueESTsContigsContigs with SNPsSNPsHigh Quality SNPReliable
SNPMatches in
dbSNP
databasePig
(Sus scrofa)Skin50410647669834441550834421Spleen733127575761503223891463595Mammary Gland2306115451461687102731174Liver12932317941276117082846644992246Cattle 
(Bos taurus)
Mammary gland10615081891158101506031246843Intestine30103943219275550Spleen 257814890808369097975415Liver 
17824919664431031023163617141157











PAGE  4!"KLop�������	"	R	S	W	X	�	�	�	K
T
V
d
�
�
�
�
BD������ø��ø������������rfWfrfh�'�h�'B*CJaJphh�'B*CJaJphh�0�h�'B*CJaJphhT&h�'5�6�hXNh�'5�	hOT5�	h�+�5�hXNh�+�5�hXNh�'h�0�h�'CJH*aJh�0�h�'CJaJh�0�h�';�CJaJh4Vxh�'5�;�CJ
h��5�CJ
h4"5�CJh4Vxh�'5�6�CJh4Vxh�'5�CJ"���	"	 
V
d
�x�������9�������������������gd6`{��hd�]�`�hgd�'�d�]�gd�'gd�'d�gd�'�d�`�gd�'gd�'gd�'
$d�a$gd�'d�gd�'Dde����p|}�������PRST�$(qu�����U�����467����������������ɸ����������������𐈐���uh�%bh�'CJaJh�'CJaJh6`{CJaJh�0�h�'CJaJh�kxB*CJaJph h�0�h�'6�B*CJaJph h�0�h�'B*CJH*aJphh��B*CJaJphh�'�h�'B*CJaJphh�'B*CJaJphh�0�h�'B*CJaJph.79�	
�9AO*2@B�������� � � � S!\!_!�!�!�"�"�"�"^#�#�#�#�#�#�#�#�$�$�$�$X%i%����������������ɾ�����ų����ۯ�����������ho7�CJaJhT&CJaJjh�'UmHnHuh�u%CJaJho7�h6`{h�0�h6`{h6`{h6`{h�u%h6`{h�'h�%bh�'h�'h�0�h�'h�%bh�'CJaJh�0�h�'CJaJh�'CJaJ69B�_!t!�"�".$�'�'�+S-_-5/p0�0111������������������

&F�xgd�'gd�'
&Fgd�'��d�`��gd�2�d�`�gd�2d�gd�'d�gd6��hd�`�hgd�'gd�'d�gd�'gd�'gd6`{i%�'�'�'�'�'�'�'�'3(B(h(l(^)`)a)b)f)g)�*�*�*�*�*�*%+&+A+B+X+�+�+�,�,�,�,-:-_-z-�-�-�-�-�-�-�-�-������������������������������������z�hw�CJaJh�0�h6�6�CJaJh�0�h6�CJaJh6�h�'6�CJaJh6�h6�CJaJh6�CJaJh�&�h�'CJaJh�0�h�'6�CJaJh�%bhT&CJaJh�%bh�'CJaJh�'CJaJh�&�CJaJh�0�h�'CJaJ/�-�-!.U.V.g.3/5/]/a/�/o01�1�1�1�1�1u2~22����������ⱍt�h�P62h�q�h�'0J B*CJaJfHphq�
����.h�q�h�'B*CJaJfHphq�
����h�q�h�'6�CJaJ1h�q�h�'5�B*CJaJfHphq�
����Fh�q�h�'0J5�B*CJaJeh@fHphq�
����r��@h�q�h�'CJaJh�0�h�yCJaJh�2CJaJh�0�hw�CJaJhw�CJaJh�0�h�'CJaJh�0�h6�CJaJh�yCJaJ1�1S2�2^3�3�456�6<7)8�8v91:�:L=P=R=�=�=>���������������������d�$�L&`#$/��IfgdT&$
&Fd���-D9DM�
����a$gd�'
$d�a$gd�'gd�'d�gd�'2�2�2�24$4%4+455�5�5
66.6?6@6F6T6U6d6e6h6i6m6n6w6x6�6�6�6�6�6�6�6�6f7y7z7�7�9�9�9L:`:�������ݺ��ݺ�©�ݺݺݺݺݺݺݺݺݞ�©�݆���.h�q�h�'B*CJaJeh@phr��@h�%bh�'CJaJ h�q�h�'5�B*CJaJphh�'CJaJh�q�h�'B*CJaJphh�q�h�'6�CJaJh�q�h�'CJaJ.h�q�h�'B*CJaJfHphq�
����,`:a:g:;;Y;Z;_;`;b;c;d;e;�;�;�;�;�;�;L=N=P=R=��ϻ�����z`������z�XMG
h�'aJh�0�h�'CJaJh6�CJaJ2h�q�h�'0J B*CJaJfHphq�
����.h�q�h�'B*CJaJfHphq�
����2h�q�h�'0JB*CJaJfHphq�
����h�q�h�'B*CJaJph&jh�q�h�'B*CJUaJphh�q�h�'CJaJh�q�h�'6�CJaJ1h�q�h�'5�B*CJaJfHphq�
����R=�=�=�=�=�=>>]>^>c>m>�>�>�>�>�>�>? ?)?3?5?6?h?i?j?�?�?�?�?�?�?�?�?�?���̳̪̪̪̪̪̿̚�x�q̪_̪_̪_̪q#h�0�h�'B*KH$\�]�aJphh�0�h�'"h�0�h�'5�6�B*]�aJphh�0�h�'5�B*]�aJphh�0�h�'6�B*]�aJphh�0�h�'aJhz}B*]�aJphh�0�h�'B*aJphh�0�h�'B*]�aJph#h4"hz}5�B*CJ]�aJph#h4"h�'5�B*CJ]�aJph#>>> >%>6>?>C>N>T>]>^>b>o>t>z>>�>�>�>�>�>�>�>�����������������������Ff$d�$�L&`#$/��Ifa$gdT&Ff�d�$�L&`#$/��IfgdT&�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>�>���������������������d��$�L&`#$/��IfgdT&Ff$
Ff$d�$�L&`#$/��Ifa$gdT&d�$�L&`#$/��IfgdT&�>�>?
????? ?(?5?6?D?K?P?U?���������������d�$�L&`#$/��IfgdT&$�L&`#$/��IfgdT&%
&F�d�$�L&`#$-D/��9DIfM�
����]�gdT&Ff3
$d�$�L&`#$/��Ifa$gdT&$�ld�$�L&`#$/��If^�la$gdT&U?[?`?e?h?i?j?t?y?}?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�����������������������Ff�d�$�L&`#$/��IfgdT&Fft$d�$�L&`#$/��Ifa$gdT&�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?��������������������d�$a$gd�'gdz}�`�gd�'Ff%d�$�L&`#$/��IfgdT&Ff$d�$�L&`#$/��Ifa$gdT&�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?�?@ddddddddddddddEdFdGdHd[d\d]d�������������̷��į���̞�ė�����؎��h�'	hT&H*
hT&6�CJhOT0JCJmHnHuhT&
hT&CJUhT&0JCJmHnHuhT&0JCJjhT&0JCJUh�g�jh�g�Uh�{�h�0�h�'aJh��h�'B*]�aJph$�?�?�?�?�?�?ddddddDdEdFdGdHdZd[d\d]d��������������������gd�'$a$d�gdT&
�����&`#$d�


PAGE  11
	

1 Corresponding author, email � avnish@lycos.com




Place for Table-1



R
00P&P	1�h:p�'@P	��. ��A!�+	"�:	#��
$��
%��+	��	0��� Dp�$$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l��
t�
6`�L���0��������"���5�J5�85��5�85��5�	�/�	�/�	
��������B�	ytz}kd$$If�l�����	�����
��t"FJ��������F8��������F���������F���������F8��������F���������F���������F���������F���������
t�
6`�L���0��������"���$����������$�������������������������������������$����������$��������������������������������������4�4�
lB�	a�ytz}�$$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l4�p
t�
6`�L���0��������"���+�5�J5�85��5�85��5�	�/�	�/�	��������B�	ytz}kd$$If�l4��p��	�����
��t"`FJ������������F8������������F�������������F�������������F8������������F�������������F�������������F�������������F�������������
t�
6`�L���0��������"���$����������$�������������������������������������$�������������������������������������$��������������������������������������4�4�
lB�	a�ytz}�$$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l4��
t�
6`�L���0��������"���+�,�5�J5�85��5�85��5�	�/�	��������B�	ytz}kd#$$If�l4�����	�����
��t"�FJ����������������F8����������������F�����������������F�����������������F8����������������F�����������������F�����������������F�����������������F�����������������
t�
6`�L���0��������"���$�������������������������������������$�������������������������������������$�������������������������������������$��������������������������������������4�4�
lB�	a�ytz}�$$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l4��
t�
6`�L���0��������"���+�,�5�J5�85��5�85��5�	�/�	��������B�	ytz}kd2	$$If�l4�����	�����
��t"�FJ����������������F8����������������F�����������������F�����������������F8����������������F�����������������F�����������������F�����������������F�����������������
t�
6`�L���0��������"���$�������������������������������������$�������������������������������������$�������������������������������������$��������������������������������������4�4�
lB�	a�ytz}�$$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l4��
t�
6`�L���0��������"���+�,�5�J5�85��5�85��5�	�/�	��������B�	ytz}kdA$$If�l4�����	�����
��t"�FJ����������������F8����������������F�����������������F�����������������F8����������������F�����������������F�����������������F�����������������F�����������������
t�
6`�L���0��������"���$�������������������������������������$�������������������������������������$�������������������������������������$��������������������������������������4�4�
lB�	a�ytz}"$$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l4��
t�
6`�L���0��������"���+�5�J5�85��5�85��5�	�/��/�	��������/���������/���������/���������B�	ytz}kdP$$If�l4�����	�����
��t"`J������������F8����������������F�����������������F�����������������F8����������������F�����������������F�����������������F�����������������F�����������������
t�
6`�L���0��������"���$�������������������������������������$�������������������������������������$����������������������������������$��������������������������������������4�4�
lB�	a�ytz}($$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l4�
t�
6`�L���0��������"���+�,�5�J5�85��5�85��5�	�/��/�	��������/���������/���������/���������B�	ytz}kd�$$If�l4����	�����
��t"�FJ������������F8����������������F�����������������F�����������������F8����������������F�����������������F�����������������F�����������������F�����������������
t�
6`�L���0��������"���$�������������������������������������$�������������������������������������$����������������������������������$��������������������������������������4�4�
lB�	a�ytz}($$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l4��
t�
6`�L���0��������"���+�,�5�J5�85��5�85��5�	�/��/�	��������/���������/���������/���������B�	ytz}kd�$$If�l4�����	�����
��t"�FJ������������F8����������������F�����������������F�����������������F8����������������F�����������������F�����������������F�����������������F�����������������
t�
6`�L���0��������"���$�������������������������������������$�������������������������������������$����������������������������������$��������������������������������������4�4�
lB�	a�ytz}$$If�!v	h#vJ#v8#v�#v8#v�#v	�:V�l4�3
t�
6`�L���0��������"���+�,�5�J5�85��5�85��5�	�/�	��������/�	�B�B�	ytz}!kd$$If�l4��3��	�����
��t"�FJ������������8������������F�������������F�������������F8������������F�������������F�������������F�������������F�������������
t�
6`�L���0��������"���$�������������������������������������$�������������������������������������$����������$��������������������������������������4�4�
lB�B�	a�ytz}j"�����666666666vvvvvvvvv66666>66666666666666666666666666�6666666666�666666666666hH66666666666666666666666666666666666666666666666666666666666666666�62���� 0@P`p������2(�� 0@P`p������ 0@P`p������ 0@P`p������ 0@P`p������ 0@P`p������ 0@P`p��8X�V~ OJPJQJ_HmH	nH	sH	tH	T`�T�'Normal$d��a$ OJPJQJ_HaJmH	sH	tH	Z@Z�'	Heading 1%$$
&F�h���x*$@&]�h5�KHR@R�'	Heading 2$
&F�h���x@&]�h5�6�V@V�'	Heading 3%$$
&F�h���x*$@&]�h6�DD
�'	Heading 4$
&F���<@&DA �D
Default Paragraph FontRi@�R
0Table Normal�4�
l4�a�(k �(
0No ListT�o��T�'Heading 1 Char5�CJKHOJPJQJ^JaJR�o�R�'Heading 2 Char5�6�CJOJPJQJ^JaJP�o�P�'Heading 3 Char6�CJOJPJQJ^JaJL�o�!L�'Heading 4 CharCJOJPJQJ^JaJJ�O2J
�'
Journal Title$����a$5�;�,�OB,�'Text
���]���8@R8�'Header

���!aJF�o�aF�'Header CharCJOJPJQJ^JaJ4 @r4�'0Footer

���!F�o�F�'0Footer CharCJOJPJQJ^JaJ.)`�.�'Page NumberD�O�D
�'	Reference
&Fd$�CJhb�o�b�'Text Indent$�.d��`�.a$OJPJQJ_HmH	sH	tH	H�OA�H
�'Abstractd��x�x5�CJaJhH�O�H
6`{NList��d�^�`�m$CJaJ6U`��6	�'0	Hyperlink>*B*ph�*W`��*�'`Strong5�\�B�o�B�'apple-converted-space8/@8
�'0List!�h���^�h`���m$PK!����[Content_Types].xml���N�0E�H���-J��@%�ǎǢ|�ș$�ز�U��L�TB� l,�3��;�r��Ø��J��B+$�G]��7O٭V��<a���(7��I��R�{�pgL�=��r���8�5v&����uQ�뉑8��C����X=��$␴�?6N�JC������F�B.ʹ'�.�+���Y�T���^e5�5�� ��ð�_�g -�;�����Yl�ݎ��|6^�N��`�?���[��PK!�֧�6_rels/.rels���j�0���}Q��%v/��C/�}�(h"���O�
����=������ ����C?�h�v=��Ʌ��%[xp��{۵_�Pѣ<�1�H�0���O�R�Bd���JE�4b$��q_����6L�R�7`������0̞O��,�En7�Li�b��/�S���e��е�����PK!ky���theme/theme/themeManager.xml�M
� @�}�w��7c�(Eb�ˮ��C�AǠҟ����7��՛K
Y,�
�e�.���|,���H�,l����xɴ��I�sQ}#Ր���� ֵ+�!�,�^�$j=�GW��)�E�+&
8���PK!0�C)��theme/theme/theme1.xml�YOo�6��w toc'vu�ر�-M�n�i���P�@�I}��úa��m�a[�إ�4�:lЯ�GR��X^�6؊�>$�������!)O�^�r�C$�y@�����/�yH*��񄴽)�޵��߻��UDb�`}"�qۋ�Jח���X^�)I`n�E���p)���li�V[]�1M<������O�P��6r�=���z�gb�Ig��u��S�eb��O������R�D۫����qu	�g��Z����o~ٺlAp�lx�pT0���+[}`j���zA��V�2�F���i�@�q�v�֬5\|��ʜ̭N��le�X�ds���jcs���7���f����
��W��+�Ն�7����`���g�Ș��J���j|��h(�K��D-����
dX��iJ�؇(��x$(��:��;�˹!�I_�T��S1�����?E��?�����?ZBΪm���U/������?�~����xY���'���y5�g&΋/����ɋ�>���G�M�Ge���D�����3Vq%'#q�����$�8��K�����)f�w9:ĵ��
x}r�x����w���r�:\TZaG�*�y8I�j�bR��c|XŻ�ǿ�I
u3KG�nD1�NIB�s���
��R��u���K>V�.EL+M2�#'�f��i~�V��vl�{u8��z��H�
�*���:�(W�☕
~��J�T�e\O*�tHG��HY��}KN�P�*ݾ˦���TѼ�9/#��A7�qZ��$*c?���qU��n��w�N��%��O��i�4=3��N���)cbJ
u�V�4����(Tn���
7��_?���m-ٛ�{U���B�w�<w���_���$�#��[Ի�8{���(�/�$Ϫ0h݋�F۴��®{L�)#7�i�%�=A�:s�$�),��Qg20pp��f
\}DU4�p
M{��DB��%J������+{�l�C���]��=��5
2F��hsF+��Y��\Ɉ�n�ì��:3���E�[��6�9����`��&45Z!��*��5k8�`Fmw��-��"�d>�z��n���ʜ"Z��x��J�Z��p;�������{/�<�P;��,)''K�Q�k5���q��pN��8�K�Gb�e���
�S��d�̛�\17	�p�a�>��SR!���

3��K4'+�r�zQ
TT��I����Ivt]K�c⫲�K#�v�5+�|��D������~��O@%\w���_�nN[�L��9K���q��g�V�h��n
R!�y+��U�n�;�*&�/H�r��T�	�>��>\
�t��=.Tġ
���S; Z�~�!����P��9gi���C�ڧ!�#	B��,��;�X=ۻ,I�2UW�V�9$l�k���=A��j���;�{�A�P79�|s*Y�����;�̠�[�MC�ۿ�hf��]o��{oY=1k�yV��V���5E8�Vk+֜���\8���0X4D)�!!��?*|f�v�
u���"�x��A�@T_������q��6�4)kڬu�V�7��t�'��%;���i�9s�9�x���,��ڎ-45x�d���8?�ǘ�d�/Y|t��&LIL�J`�& �-G�t�/��PK!
ѐ��'theme/theme/_rels/themeManager.xml.rels��M
�0���wooӺ�&݈Э���5
6?$Q��
�,.�a��i����c2�1h�:�q��m��@RN��;d�`��o7�g�K(M&$R(.1�r'J��ЊT���8��V�"��AȻ�H�u}��|�$�b{��P����8�g/]�QAsم(����#��L�[������PK-!����[Content_Types].xmlPK-!�֧�60_rels/.relsPK-!ky���theme/theme/themeManager.xmlPK-!0�C)���theme/theme/theme1.xmlPK-!
ѐ��'�	theme/theme/_rels/themeManager.xml.relsPK]�
<?xml version="1.0" encoding="UTF-8" standalone="yes"?>
<a:clrMap xmlns:a="http://schemas.openxmlformats.org/drawingml/2006/main" bg1="lt1" tx1="dk1" bg2="lt2" tx2="dk2" accent1="accent1" accent2="accent2" accent3="accent3" accent4="accent4" accent5="accent5" accent6="accent6" hlink="hlink" folHlink="folHlink"/>%7��������������%7f����	((((\_D7i%�-2`:R=�?]d "#%&()*091>�>�>U?�?�?]d!$'+,-./13Y3_3d3�3�3%7X��X�� #_!����!�����8�@������������z�(	�
��B�
�
��F�����?���"Text Box 6S"��Ú���?��PK!��8���[Content_Types].xml��AN�0E�H��%N�@%邴K@�`dO�dlyLho���D�X�3��'���AL�:��*/�@��X�*���eRp208�J�妾�)�G�,R���}��Q)�=����HiҺ0BL��)�:T뢸W�QD�Y�;d]6������O&���8�*	�VCL�j"󃒝	yJ.;�[�wIC�_	��:�{IO�A�
!>Ø4�	�p���;fɑ3׶Vc��.��ӵn�(����&��p�����o��PK!8�!���_rels/.rels���j�0���}q���N/��k��؊c[F2��3��2z�Q����L�Z�%R6��zP����������T��](��
�LJ�[ۑ̱�j�,�Z˫��fLV:*��f"N����.�]m@=���7Lu���P�[i�?���T;GI�4Ew��=}�3��b9`5�Y�CƵkρ����ؖ9�#ۄo�~�e?z��r���PK!�m�)Pdrs/e2oDoc.xml�T�n�0}���I�45�]����dY��I�&)���%�Y�m/�� �&uH�Cy};hE�y	���IN�0jiڒ~}ڽYQ�35S`DI������W��b�Z8� ��-i�-���Nh�'`�AgN���k�ڱѵ�fy��zp�u�����~t�M�o����"UR�-�ݥ��{�Y��u�v���`�P�f�`�3�=��
JK�C&tM#�H=`7�E7��"���x{��?X����Y�tI�a%zC oa ��No}�A��€�Q�ԩ���yb`�1ӊ;�����i��]\q|���Pc������H�AU:������j�����*���'�2V<߶·�4���:T>��Ã�V<��d��wR�d���*G�d�Vj�E�2�/��b�	�+D�֟ �8�J꒮�A����3u���X�2'#u#�a���.�Gd�8��Ё�AI�#]R�}Ϝ�D}0���t�������z����T�f8B�4P2�a|7{�d�a�qܡ��L$G�ǪNu��&�OO,��K;E��l~��PK!�"��drs/downrev.xmlL��N�0E�H��5HlupK��8B�
��O�?����V����;�֛�6a��w�0t�׃�$���_��bRN+�J�����V��G���6u�B\���>���<�=Z~DG��V%C�uPG
���,˹U�����s{���������m�7�tQL_A��X�9���O�А�����H(��	� ���(��hs-
�M�wh~��PK-!��8���[Content_Types].xmlPK-!8�!���/_rels/.relsPK-!�m�)P.drs/e2oDoc.xmlPK-!�"���drs/downrev.xmlPK����
��B
�S����	?��%7:�#�	t��������	��NTbm������������PT��
k
p
�
�
EJ,1)4����mt���:E��)0IO��*/9@	v}#*%,�������ei*/v}"9?\d����������.5?F��
��3 : ; B 	!!�!�!G"L"�"�"�"�" #%#�#�#B%G%�%�%G&L&\&`&(())�)�)�)�)�)�)�)�)�)�)S*Z*^*g*�*�*^+g+�+�+�+�+,,,,,!,�,�,-$-)---2-8-=-D-�-�-�-�-�-�-...!...2.z..�.�.</I/M/U/�/�/�0�0�0�0�0�0�0�0G1P1�1�11252L2R2�2�2�2�2�23�3�34!4�4�4�4�455+5.5/555�5�5�5�5�6�6�6�6�6�6�6�6�677#7&7
U]�5�5�6�6�6�6�6�6�6�6�677#7&7333!"KL"�������������b!f!�"�"�"�"%#X#S$S$�$�$�$�$%:%R%R%_%!&U&g&3'5'V'V']'a'�'�'�'�'�'�'�'o(n4o4�6�6�6�6�6�6&7�KZA�7Z�������`��R�	���m�^��`�m�56o(.   	�@���^�@`���56o(..   	�@���^�@`���56o(	...   	�@����^�@`���56o(
...   	�l���l^�l`��o(	....��h	
������^��`��o(
......	
��`��^�`�`�o(.......	
������^��`��o(........�h����h^�h`���.�KZA�`��������������2<R4"�u%T&�',:>OT�kx�y6`{z}:>�o7�{M�w��+��&��{���6��g��6�6�@�����4�3�4�6%7�@�<�|@��@��Unknown������������G��*�Ax�	�Times New Roman5��Symbol3.��*�Cx�	�Arial7.���@�CalibriA���$B�Cambria Math"q���h�")�8#)�
g*�.�c,�.c!�+	�
����20�6�6	K�Q���HX	�	$P�����������������������'2!xx����avnishavnish����Oh��+'��0X�������	��
 
,8@HP�avnishNormal.dotmavnish13Microsoft Office Word@*�c@J˝���@4�y��*�.����՜.��+,��D��՜.��+,��@�hp��������
���Hewlett-Packard Companyc�6Title� 8@_PID_HLINKS�Ah3>?http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Dillman%20A%5Bauth%5DQL=http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Chong%20S%5Bauth%5D	

 !"#$%&'()*+,-./0123����56789:;<=>?@AB����DEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ[\]����_`abcde����ghijklm��������pq��������t������������������������������������������������Root Entry��������	�F����sData
������������4H1Table��������C4WordDocument
����TfSummaryInformation(������������^DocumentSummaryInformation8��������fMsoDataStore���������G�����]���5�����E�Y�4��X��R3R���==2���������G�����]���Item
����	�����Properties������������UCompObj����
r����������������	����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������<b:Sources SelectedStyle="\APA.XSL" StyleName="APA" xmlns:b="http://schemas.openxmlformats.org/officeDocument/2006/bibliography" xmlns="http://schemas.openxmlformats.org/officeDocument/2006/bibliography"></b:Sources>
<?xml version="1.0" encoding="UTF-8" standalone="no"?>
<ds:datastoreItem ds:itemID="{E276487E-3531-4763-A7C1-7A7D45D47CE3}" xmlns:ds="http://schemas.openxmlformats.org/officeDocument/2006/customXml"><ds:schemaRefs><ds:schemaRef ds:uri="http://schemas.openxmlformats.org/officeDocument/2006/bibliography"/></ds:schemaRefs></ds:datastoreItem>��
����	�F Microsoft Word 97-2003 Document
MSWordDocWord.Document.8�9�q

Youez - 2016 - github.com/yon3zu
LinuXploit